人参 黄芪成分、功效与作用、临床应用 - 中药对药化学

7.人参 黄芪 : 【中医理论】
黄芪、人参各等份,为末。又名玉屑膏,载于《三因方》(卷九),《兰台轨范》卷五中亦名玉屑散。治尿血并五淋砂石,疼痛不可忍。人参、黄芪均为补气药,人参大补元气,黄芪益气升阳,二药相伍,补元气,生精血,化气行水,淋病日久,气血俱虚者用之,则小便利而淋证除。因黄芪偏于温补固护,人参偏于滋补强壮,是甘温补气的重要配伍,可用于气虚神疲、食少、自汗等身体虚弱诸症。对阴血不足之证,亦可配用。方如补中益气汤。
【药理研究】
1.对小鼠免疫功能的影响
陆氏等^[1]针对肿瘤病人经放、化疗后导致的免疫功能低下和骨髓造血功能抑制等不良反应,研究参芪胶囊(由人参、黄芪、当归、熟地黄、鹿角等中药组成)对小鼠免疫功能影响:取参芪胶囊浸膏粉50g,溶解于100ml蒸馏水中,加入95%使其含醇量达到70%,于4℃静置24h,过滤弃沉淀,回收乙醇,经漏斗过滤,以蒸馏水配制成150%溶液,临用前再以RPMI-1640稀释。
1.1参芪胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
取65只小鼠,随机分成5组,每组13只。分别给予生理盐水、参芪胶囊2、4、8g/kg、参芪片4g/kg,每日灌胃1次,每次每鼠给药容积为15ml/kg,连续7d。每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水悬液0.5ml,6h后脱颈椎处死,用油镜观察并计算吞噬百分数和吞噬指数。结果见表12-7-1。

表12-7-1 参芪胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(±s,n=13)

组别 剂量g·kg-1 吞噬百分率(%) 吞噬指数 生理盐水组 - 31.08±12.37 0.4948±0.2040 参芪胶囊组 2
4
8 54.31±11.58**
51.47±11.54**
54.78±11.39** 0.9960±0.4641**
0.9675±0.3527**
0.7828±0.2435** 参芪片组 4 56.76±10.08** 0.9852±0.2983**

与正常组相比:* * P<0.01
由表12-7-1可见,参芪胶囊的3个剂量均可显著增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,提高巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。
1.2 参芪胶囊对小鼠免疫器官重量的影响
将小鼠随机分为正常组、造模组、参芪胶囊3个剂量组、参芪片组,每组10只。每日按0.15 ml/10 g体重小鼠灌胃给药1次,连续7d,给药d4皮下注射环磷酰胺100mg/kg。各组动物于末次给药后30min,脱颈椎处死,称体重,摘取脾、胸腺,称重。以器官重量(mg)与体重(g)的比值为指标。

表12-7-2 参芪胶囊对小鼠免疫器官的影响(±s,n=8)

组别 剂量/g·kg-1 脾指数 胸腺指数 正常组
造模组 -
- 5.73±2.90
1.96±0.21* 4.97±0.74
1.95±0.33** 参芪胶囊组 2
4
8 2.57±0.58**
2.20±0.23*
2.21±0.15* 2.54±0.34*
2.30±0.18*
2.29±0.22* 参芪片组 4 2.37±0.53* 2.29±0.15*

与正常组相比:#P<0.05,##P<0.01;与模型组相比,* P<0.05,**P<0.01
结果表明,参芪胶囊3个剂量均可显著对抗环磷酰胺所致的小鼠脾指数和胸腺指数的下降。
1.3 参芪胶囊对小鼠网状内皮系统的影响
将小鼠随机分为正常组、造模组、参芪胶囊3个剂量组、参芪片组,每组10只。每日按0.15ml/10 g灌胃给药1次,连续7 d。于给药第4d皮下注射环磷酰胺100mg/kg。各组动物于末次给药30 min后,尾静脉注射印度墨汁(用生理盐水按1:4稀释)0.1 ml/10 g,于注入墨汁后1、5 min分别从眼眶取血20μl,立刻加入2 ml0.1% Na2 CO3 溶液中。以0.1%Na2 CO3 溶液为对照,于型紫外分光光度计268mm处比色。
动物处死后称体重,并摘取动物的肝脏、脾脏称重。按下式计算K(廓清指数)、α(吞噬指数)。K=(IgOD1-IgOD2)/(t2-t1),α=3K×体重/(肝重+脾重)。

表12-7-3 参芪胶囊对小鼠RES系统吞噬功能的影响(±s, n=8)

组别 剂量g·kg-1 廓清指数 吞噬指数 正常组
造模组 -
- 0.094±0.0659
0.030±0.0175* 6.829±1.62
5.109±1.22# 参芪胶囊组 2
4
8 0.056±0.0187**
0.073±0.0560*
0.078±0.0247* 6.364±1.20**
6.454±1.34*
7.352±1.26* 参芪片组 4 0.062±0.0333* 6.375±1.11*

与模型组相比:# P<0.05,# #P<0.01;与正常组比,* P<0.05,* * P<0.01
结果表明,参芪胶囊的3个剂量均可显著增强小鼠RES系统吞噬能力,可对抗环磷酰胺所致的RES系统吞噬能力的下降。
1.4 参芪胶囊对60Co照射模型小鼠溶血素含量的影响
取小鼠60只,雌雄各半,随机分成6组,每组10只,分组及给药同前。除正常组外,其余组于给药每1d进行60Co照射(3.5Gy,150伦琴/min),给药后的第2d所有小鼠每只腹腔注射5%CRBC0.5ml进行免疫。连续给药,第7d采血、取血清,用NS稀释血清5倍,取稀释的血清1ml与5%CRBC0.5ml、10%补体0.5ml混合,在37℃恒温水浴1h,0℃终止反应,2000r/min,离心5min,取上清,于分光光度计比色,测OD540nm,以OD值作为判断血清溶血素的指标,比较各组的差异。

表12-7-4 参芪胶囊对60Co模型小鼠溶血素含量的影响(±s,n=10)

组别 剂量g·kg-1 OD值 正常线
造模组 -
- 1.286±0.431
0.130±0.039## 参芪胶囊组 2
4
8 0.211±0.065**
0.236±0.120*
0.376±0.153** 参芪片组 4 0.244±0.075**

与正常组比绞:## P<0.01;与模型组比较:*P<0.05,* * P<0.01
结果表明,参芪胶囊对60Co照射所致的小鼠溶血素下降的水平有显著的提高作用。
1.5参芪胶囊对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响
将小鼠断头放血处死,无菌取出脾脏置于盛有RPMI-1640培养液的平皿中,制成脾细胞悬液。将此悬液用RPMI-1640培养液洗涤2次,每次1500r/min,离心5min,用0.6%台盼蓝溶液记数活细胞。然后用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液将细胞稀释为1×107/ml,并接种于无菌的96孔培养板中,每孔50μl,分组并加入下列处理因素:空白对照组:加RPMI-1640培养液;参芪组:分别加以终浓度为10、50、100、500μg/ml的参芪液;ConA对照组:加入终浓度为1μg/ml ConA;ConA+SQT组:除加入终浓度为1μg/ml ConA外,另分别加入以终浓度为10、50、100、500μg/ml的参芪液;LPS对照组:加入终浓度为4μg/ml;LPS+参芪组:除加入终浓度为4μg/ml LPS外,另分别加入终浓度为10、50、100、500μg/ml的参芪液;每剂量组设3复孔,每孔总容积均为200μl。置37℃,5%CO2和95%空气的细胞培养箱中孵育72h。终止培养前6h,每孔加入3H-TdR0.5μCi。用多头细胞收集器将各孔之细胞吸于49型玻璃纤维滤膜上,蒸馏水洗10次,置于80℃烘箱中15min,然后将滤膜放入盛有5ml闪烁液的闪烁瓶中,用液闪仪测定cpm值。结果表明:参芪液不仅在体外可以增强ConA诱导的T淋巴细胞增殖反应和LPS刺激引起的B淋巴细胞增殖反应,而且它本身对脾细胞也具有丝裂原作用。

表12-7-5 参芪液对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响(±s)

组别 剂量
/μg·ml-1 3H-TdR掺入(cpm) RPMI-1640 ConA(1μg/ml) LPS(4μg/ml) 对照组 - 2333±274 7322±709## 8245±367** 参芪液 10
50
100
500 2649±350
3898±233
7701±1894
10389±1730 8981±270*
13890±2099**
33930±3529**
40242±2945** 13205±1033**
22658±2766**
53241±4406**
110888±13157**

与对照组比较:* P<0.05,* * p<0.01;与RPIM-1640比较:# #P<0.01
1.6 参芪胶囊对60Co照射小鼠白细胞数及骨髓DNA含量的影响
取小鼠60只,随机分为6组,每组10只。设正常组、造模组、参芪胶囊组低、中、高剂量组(2g/kg、4 g/kg、8 g/kg),参芪片(4 g/kg)组,每鼠给药容积为15 ml/kg,除正常组外,其余各组均进行60Co照射,剂量为3.5Gy(150伦琴/min)。以后每天给药1次,连续7d,第7d给药30 min后,眼眶静脉取血,测定白细胞数。并取一侧股骨,剔除软组织。用0.005 mmol/L CaCl2 8 ml冲洗骨髓,4℃冰箱放置30 min; 2 500 r/min,离心15 min,弃上清,加入0.2 mol/LHClO4 5 ml,混匀,90℃加热30 min,冷却,过滤,滤液用紫外分光光度计测OD268 nm,比较各组的OD值。

表12-7-6 参芪胶囊对60Co照射小鼠白细胞减少及骨髓DNA含量的影响(±s,n=10)

组别 剂量/g·kg-1 白细胞数/×109·L-1 骨髓DNA OD268nm 正常组
模型组 -
- 7.417±1.84
0.842±0.14## 1.230±0.266
0.555±0.261## 参芪胶囊 2
4
8 1.050±0.144
1.267±0.51*
1.583±0.53** 0.869±0.327*
1.085±0.266**
1.144±0.281** 参芪片 4 1.142±0.44* 0.126±0.274**

与正常组相比:##P<0.01;与模型组相比:*P<0.05,**P<0.01
由表12-7-6可见,参芪胶囊对60Co照射所致的小鼠白细胞减少有升高作用,且呈一定的量效关系,并可以对抗60Co所致的小鼠骨髓DNA含量的减少。
2.对心肌缺氧再给氧损伤的影响
李氏^[2]采用临床治疗冠心病心绞痛的有效中药复方参芪心复康对抗培养心肌细胞缺氧再给氧损伤获得了较好的效果。取人参3g,黄芪15g,丹参10 g,水蛭2g置于烧杯中,加蒸馏水至150 ml,放置电炉上熬至50 ml后,离心取上清液,再加蒸馏水分别稀释成5%、1%、0.2%参芪心复康煎液,高压消毒后备用。
实验对照组:加Hank’s液0.1 ml;实验组:分别加5%、1%、0.2%参芪心复康0.1 ml;正常对照组:加Hank氏液0.1 ml。其中前4组均接受缺氧再给氧损伤造模,而正常对照组不接受缺氧再给氧损伤。缺氧再给氧损伤对培养心肌细胞的影响见表12-7-7。从表12-7-7可见,实验对照组在接受缺氧再给氧损伤后,与的正常对照组比较,LDH、CK和MDA值均明显增高,T-SOD和Mn-SOD明显降低,两组之间的差异有高度显著性(P<0.01),结果提示:造模获得了成功。

表12-7-7 缺氧再给氧损伤对培养心肌细胞的影响(±s)

　 n LDH(U/L) CK(U/L) MDA(nM/ml) T-SOD(NU/ml) Mn-SOD(NU/ml) 正常对照组
实验对照组 12
12 84.74±7.86**
286.45±35.76 23.29±4.53**
85.76±9.48 0.46±0.11**
1.46±0.31 30.48±5.37**
12.94±2.74 17.75±4.82**
8.38±2.01

与实验对照组比较:* *P<0.01
从表12-7-8可见,不同浓度的参芪心复康均可降低心肌细胞上清液中LDH、CK、MDA的水平和提高心肌细胞上清液中T-SOD和Mn-SOD的活性,但实验1组与实验对照组比较,差异无显著性(P>0.05);而实验2组和实验3组与实验对照组比较,LDH、CK、MDA降低,T-SOD、Mn-SOD增高,差异有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01)。三种不同浓度的参芪心复康中,尤以1%(实验2组)和0.2%(实验3组)煎液效果更为明显,与5%参芪心复康比较,LDH、CK、MDA降低,T-SOD、Mn-SOD增高,差别有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01)。1%参芪心复康与0.2%参芪心康复相比较,LDH、CK、MDA降低,T-SOD、Mn-SOD增高,但两组间无显著性差异(P>0.05)。

表12-7-8 参芪心复康对培养心肌细胞缺氧再给氧损伤的影响(±s)

　 n LDH(U/L) CK(U/L) MDA(nM/ml) T-SOD(NU/ml) Mn-SOD(NU/ml) 实验对照组
实验1组
实验2组
实验3组 12
12
12
12 286.45±35.76
248.65±31.57
182.74±22.46**▲
196.83±21.89**▲ 85.76±9.48
73.54±9.75
45.65±5.83**▲▲
48.67±6.82**▲▲ 1.46±0.31
1.23±0.37
0.67±0.16**▲
0.91±0.22* 12.94±2.74
15.33±3.48
21.47±2.96**▲
19.75±2.51* 8.38±2.01
10.89±1.94
15.32±2.14**▲
13.94±1.87**

与实验对照组比较:* P<0.05,* * p<0.01;与实验1组比较:▲P<0.05,▲▲P<0.01
3.对家兔抗血小板聚集及降低血脂、血粘作用^[3]
将兔在实验环境饲养1周,剔除血脂过高、过低的动物。按体重及TC值,随机分为5组:正常组:饲基础饲料;高脂模型组:每天每兔给胆固醇1g,熟猪油5g,丙基硫氧嘧啶5mg/kg加基础饲料。脂必妥0.47g/d加高脂饲料组;芪参益智大剂量组:高脂饲料加芪参益智粉1.2g/kg·d。芪参益智小剂量组:高脂饲料加芪参益智粉0.6g/kg·d。每笼内饲1只兔,每组8只,高脂组10只兔。每天上午时,用饲喂法投予兔药、脂小团块,观察兔全部吃完后再补给基础饲料,共12周。实验前,经耳缘静脉采血,每6周后动物禁食16h,采血1次,测定血清总胆固醇(TC),和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(用磷钨酸-Mg2+沉淀后用酶法测试)。于实验结束时,用自动分析仪,测试全血粘度、血浆粘度和纤维蛋白原(采血同前肝素抗凝)。兔耳动脉采血,枸橼酸钠抗凝(1:9),3500r/min离心,分离PRP和PPP,用ADP做诱导剂,测试血小板3min时最大聚集率。
动物一般状况:实验过程中小剂量组、脂必妥组及模型对照组均死亡1只动物,各组动物体重增长正常,各组间无显著性差异(P>0.05),各组动物健康状态以大剂量组为佳,毛浓密,洁白有光泽。
芪参益智胶囊对血脂的影响:饲喂高胆固醇6周后,高脂对照组血清TC、TG、LDC-C均较正常组显著升高,TC升高14倍,12周升高约22倍。而给予芪参益智粉各组的升高程度低于对照组,且抑制动脉硬化指数,与阳性对照组(脂必妥)相近,以大剂量组作用显著(P<0.01),小剂量组有降低血脂的趋势,无统计学意义,见表12-7-9。

表12-7-9 各组血脂比较(±s)

组别 n TC(nmol/L) TG
(mmol/L) LDL-C
(mmol/L) HDL-C
(mmol/L) TC/HDL-C 0周 6周 12周 正常组
模型组
脂必妥组
大剂量组
小剂量组 8
10
8
8
8 1.73±0.21
1.68±0.32
1.87±0.50
1.77±0.36
1.74±0.45 2.23±3.80
24.78±7.40ΔΔ
16.31±5.40
17.28±3.90
20.33±4.40 1.96±0.41
38.10±5.80△△
28.94±6.10*
22.46±9.70**
0.91±0.50 0.61±0.16
1.16±0.22△△
0.66±0.22*
0.73±0.43*
32.58±12.90 0.93±0.31
32.80±4.70ΔΔ
22.70±5.50**
19.24±7.40**
22.86±10.24* 0.83±0.16
6.10±1.16
5.36±0.54
4.43±1.49
5.49±1.80 2.61±0.25
6.30±0.89
5.53±0.95
4.89±0.93**
5.79±1.16

与正常组比较:△△P<0.01;与高脂组比较:* P<0.05,TG、LDL-C、HDL-C为实验结束时测值。
芪参益智胶囊对实验性AS兔血液流变学的影响:结果见表12-7-10,模型组兔全血粘度(高切、中切、低切)、血浆粘度及纤维蛋白原均呈明显升高,与正常组比较差异非常显著(P<0.01),而各给药组的血液流变学各测试值有不同程度改善,以大剂量组的改善程度为佳(P<0.05;P<0.01),优于脂必妥组,而小剂量组则仅有改善的趋势(P>0.05),其中仅纤维蛋白原作用明显(P<0.05)。

表12-7-10 各组血液流变学各指标测试值比较(±s,mPa)

组别 n 全血粘度 血浆粘度 纤维蛋白原 高切(200S-1) 中切(30S-1) 低切(3S-1) 正常组
模型组
脂必妥组
大剂量组
小剂量组 8
10
8
8
8 4.18±0.51
5.39±0.68
4.89±1.18
4.31±1.10*
5.21±0.52 4.60±0.75
6.13±0.59ΔΔ
5.35±1.29
4.72±1.18*
5.72±0.55 8.35±1.80
10.77±1.37ΔΔ
9.48±2.11
8.36±1.35**
10.11±0.76 1.12±0.13
1.47±0.15ΔΔ
1.43±0.11
1.21±0.22*
1.35±0.85 2.23±0.49
3.68±0.57ΔΔ
2.77±0.90*
2.69±0.59**
2.91±0.58*

与正常组比较:△△P<0.01;与模型组比较:*P<0.05,**P<0.01
芪参益智胶囊对高脂血症家兔血小板聚集性的影响:结果见表12-7-11。模型组血小板聚集性增强,其3 min最大聚集率较正常组有显著增高(P<0.01),给予芪参益智的2组中,大剂量组有抑制血小板聚集的作用(P<0.05),而小剂量组则仅有抑制的趋势(P>0.05)。

表12-7-11 各组血小板聚集性比较(±s)

组别 n 血小板聚集性 正常组
模型组
脂必妥组
大剂量组
小剂量组 8
9
7
8 22.18±4.20
45.33±7.40ΔΔ
35.90±8.30*
34.12±4.60*
41.20±6.20

与正常组比较:△△P<0.01;与AS组比较:* P<0.05
【临床应用】
席氏^[4]以白参、黄芪、茜草等数味中药,经过精选制成参芪升血冲剂经临床验证,取得满意效果。肿瘤患者100人,其中鼻咽癌患者61人,肺癌患者9人,其他癌症患者30人,经放疗56 d后,经查血象有一定程度下降者,随机分成二组。治疗组50人,口服参芪升血冲剂,每次10～20 g, tid;对照组50人,口服鲨肝醇,每次50～100 mg, tid,利血生每次10～20 mg, tid。各组观察2个月,每周做血常规检查1次,并记录统计。以血小板、血红蛋白为指标。结果见表12-7-12。

表12-7-12 参芪升血冲剂对放疗肿瘤患者血小板、血红蛋白的影响(±s)

分组 给药时间 血小板(109/L) 血红蛋白(g/L) 治疗组 给药前
给药后 179±4.3
230±3.9** 139±3.8
150±1.7** 对照组 给药前
给药后 164±3.5
177±3.3 134±3.0
130±2.9

与对照组给药后,治疗组给药前比较:** P<0.01
100例放疗患者经过2个月参芪升血冲剂对照治疗观察,8次血常规检验与数理统计,结果显示出其显著的升高血小板及血红蛋白的作用。